Isolation of Saprolegnia aenigmatica oomycetes and protocol for experimental infection of pacu (Piaractus mesopotamicus) / Isolamento do oomiceto Saprolegnia aenigmatica e protocolo de infecção experimental em pacu (Piaractus mesopotamicus)

Successful disease treatment depends on molecular studies under indoor conditions with experimental infection protocols that facilitate understanding the disease and the drug`s efficacy. The internal transcribed spacer (ITS) region was sequenced from three isolates, which were identified as Saprolegnia aenigmatica. Subsequently, healthy fish were immunosuppressed with dexamethasone (1.2 mg kg-1) and descaled to the skin using a sharp scalpel. These individuals were isolated in individual aquariums maintained at 22°C. Individuals in one group were subcutaneously inoculated with 9,000 zoospores (DDZ treatment), a second group was exposed to oomycetes in water with three colonized baits (DDB), a third group was maintained in water without zoospores (DD), and a control group (C) consisted of healthy animals. After 48 and 96 hours, two animals from each group were euthanized for fungal reisolation. The fish from groups DD and C did not show clinical signs, and no oomycetes were isolated. The animals from the DDZ and DDB groups showed cotton-wool-like masses on the skin, and S. aenigmatica was re-isolated. Thus, for infection using zoospores or baits parasitized by S. aenigmatica, an immunosuppressor (dexamethasone) and a sharp scalpel can be used effectively to establish an experimental infection in P. mesopotamicus.

O sucesso do tratamento de uma enfermidade depende do estudo de moléculas em condições de laboratório por meio de protocolos de infecção experimental que viabilizam a compreensão da doença e da eficácia dos fármacos. Pela sequência ITS foram identificadas três cepas de Saprolegnia aenigmatica. Dessa forma, pacus sadios foram submetidos à imunossupressão com dexametasona (1,2 mg kg-1), esfoliados com auxílio de bisturi e distribuídos em aquários a 22ºC. Após este procedimento, um grupo de animais foi inoculado com 9.000 zoósporos/peixe subcutâneo (DEZ), a outro foram adicionadas três iscas colonizadas com o oomiceto na água (DEI), um terceiro grupo foi mantido sem contato com o oomiceto (DE) e um quarto grupo, de animais sadios, representaram o controle (C). Após 48 e 96h deste procedimento, foram eutanaziados animais de cada grupo para reisolamento. Os animais do grupo DE e C não apresentaram sinais clínicos e não foi reisolado o oomiceto. Porém, tanto os animais do grupo DEZ quanto como os animais do grupo DEI apresentaram micélio branco na pele e foi reisolado Saprolegnia aenigmatica. Assim, a infecção com zoósporos ou com iscas colonizadas por S. aenigmatica, com o uso de dexametasona e abrasivo epitelial são formas eficazes de infecção experimental em P. mesopotamicus.

Sensitivity of aquatic organisms to ethanol and its potential use as bioindicators / Sensibilidade de organismos aquaticos ao etanol e seu potencial uso como bioindicadores

The aim of this research was to evaluate the feasibility for the use of the organisms Lemna minor, Azolla caroliniana, Hyphessobrycon eques, Pomacea canaliculata and Daphnia magna as exposure bioindicators for ethanol (lethal and effective concentration 50% - LC50(I)/EC50(I)). Thus, the following concentrations were used 5.0; 10.0; 20.0; 30.0; 40.0 and 50.0 mg L-1 ethanol on L. minor; 25.0; 50.0; 75.0; 100.0; 150.0 and 200.0 mg L-1 on A. caroliniana; 0.3; 0.5; 1.0; 2.0 and 3.0 mg L-1 on H. eques; 0.05; 0.10; 0.20; 0.40 and 0.80 mg L-1 on P. canaliculata; and 40.0; 60.0; 80.0; 100.0; 120.0 and 140.0 mg L-1 on D. magna. An untreated control was also kept for all organisms, with three repetitions. The increase in the ethanol concentration elevated the electrical conductivity and decreased the water dissolved oxygen and pH. The ethanol LC50 for L. minor and A. caroliniana were 12.78 and 73.11 mg L-1, respectively, and was classified as slightly toxic; 1.22 mg L-1 for H. eques (moderately toxic); 0.39 mg L-1 for P. canaliculata (highly toxic) and 98.85 mg L-1 for D. magna (slightly toxic). Thus, H. eques and P. canaliculata have showed good potential for the use as ethanol exposure bioindicators on water bodies.

O objetivo deste estudo foi avaliar a viabilidade do uso dos organismos teste Lemna minor, Azolla caroliniana, Hyphessobrycon eques, Pomacea canaliculata e Daphnia magna como bioindicadores de exposição ao etanol (concentração letal e efetiva 50% - CL50(I)/CE50(I)). Assim, foram utilizadas as seguintes concentrações: 5,0; 10,0; 20,0; 30,0; 40,0 e 50,0 mg L-1 de etanol para L. minor; 25,0; 50,0; 75,0; 100,0; 150,0 e 200,0 mg L- 1 (A. caroliniana); 0,3; 0,5; 1,0; 2,0 e 3,0 mg L-1 (H. eques); 0,05; 0,10; 0,20; 0,40 e 0,80 mg L-1 (P. canaliculata ) e 40,0; 60,0; 80,0; 100,0; 120,0 e 140,0 mg L-1 para D. magna, todos com controle em triplicata. O aumento da concentração do etanol elevou a condutividade elétrica e diminuiu o oxigênio dissolvido e o pH da água. A CL50 do etanol para as macrófitas L. minor e A. caroliniana foi 12,78 e 73,11 mg L-1, respectivamente, sendo classificado como ligeiramente tóxico; para o H. eques, foi de 1,22 mg L-1 (moderadamente tóxico); 0,39 mg L-1 para o P. canaliculata (altamente tóxico) e 98,85 mg L-1 para D. magna (ligeiramente tóxico). Assim, o H. eques e o P. canaliculata apresentaram potencial para uso como organismos bioindicadores de exposição do etanol em corpos hídricos.

Análise histoquímica das glândulas anexas do aparelho reprodutor do macho de paca (Cuniculus paca) / Histochemical analysis of the accessory glands of male paca (Cuniculus paca)

Paca is a wild rodent typical of the tropical region. In order to study this species with focus on the proper management and preservation, this study aims to characterize the histochemistry of the accessory glands of the reproductive tract of the male paca. For this purpose, histological sections were stained with Periodic Acid-Schiff (PAS), Alcian Blue (AB), PAS + AB e PAS + Amilase. In the histochemical reaction of the bulbouretral gland was found that the epithelium produces secretion rich in neutral and acid glycoproteins, glycosaminoglycans, and in some regions produces more than one type of secretion. The epithelium did not contain any glycogen. In the vesicular gland the epithelium had bush border stained by neutral glycoproteins, but no acid glycoproteins, glycogen or glycosaminoglycan. The coagulating gland showed small amount of neutral glycoproteins in the brush border of the epithelium, without glycogen. It is concludes that the accessory glands of paca have histochemical characteristics that share some similarity with other species of the Order Rodentia, with some glands with neutral and acid glycoproteins, mainly in the epithelium of the bulbouretral gland and in the brush border of the other glands.

A paca (Cuniculus paca) é um roedor típico de regiões tropicais. Com a finalidade de estudar esta espécie selvagem para manejo adequado e sua preservação, objetivou-se neste trabalho caracterizar a histoquímica das glândulas anexas do trato reprodutor do macho da paca. Para este fim, cortes histológicos dessas glândulas foram submetidas às reações histoquímicas com Ácido Periódico de Schiff (PAS), Alcian blue (AB), PAS. + AB. e PAS + Amilase. Na glândula bulbouretral foi constatado que o epitélio produz secreção rica em glicoproteínas neutras e ácidas, glicosaminoglicanas, e em algumas regiões produz mais de um tipo de secreção. Não foi observada a presença de glicogênio no epitélio. Na glândula vesicular, seu epitélio em borda em escova corou-se por glicoproteínas neutras e também por substância de composição desconhecida, não contendo glicoproteínas ácidas, glicogênio ou glicosaminoglicanas. Verificou-se presença de pequena quantidade de glicoproteínas ácidas e neutras na próstata, em especial na mucosa, além de glicoproteínas ácidas carboxiladas e sulfatadas em pequena quantidade no tecido conjuntivo da lâmina própria dessa glândula. Por fim, a glândula coaguladora apresentou pequena quantidade de glicoproteínas neutras na borda em escova de seu epitélio e substância de composição desconhecida, sendo ausente o glicogênio. Conclui-se que as glândulas anexas do trato reprodutor da paca apresentam características histoquímicas que compartilham certa similaridade com outras espécies da ordem Rodentia, com a presença de glicoproteínas neutras e ácidas em algumas glândulas, principalmente no epitélio da glândula bulbouretal e na borda em escova do epitélio das demais glândulas.

Análise histoquímica das glândulas anexas do aparelho reprodutor do macho de paca (Cuniculus paca) / Histochemical analysis of the accessory glands of male paca (Cuniculus paca)

A paca (Cuniculus paca) é um roedor típico de regiões tropicais. Com a finalidade de estudar esta espécie selvagem para manejo adequado e sua preservação, objetivou-se neste trabalho caracterizar a histoquímica das glândulas anexas do trato reprodutor do macho da paca. Para este fim, cortes histológicos dessas glândulas foram submetidas às reações histoquímicas com Ácido Periódico de Schiff (PAS), Alcian blue (AB), PAS. + AB. e PAS + Amilase. Na glândula bulbouretral foi constatado que o epitélio produz secreção rica em glicoproteínas neutras e ácidas, glicosaminoglicanas, e em algumas regiões produz mais de um tipo de secreção. Não foi observada a presença de glicogênio no epitélio. Na glândula vesicular, seu epitélio em borda em escova corou-se por glicoproteínas neutras e também por substância de composição desconhecida, não contendo glicoproteínas ácidas, glicogênio ou glicosaminoglicanas. Verificou-se presença de pequena quantidade de glicoproteínas ácidas e neutras na próstata, em especial na mucosa, além de glicoproteínas ácidas carboxiladas e sulfatadas em pequena quantidade no tecido conjuntivo da lâmina própria dessa glândula. Por fim, a glândula coaguladora apresentou pequena quantidade de glicoproteínas neutras na borda em escova de seu epitélio e substância de composição desconhecida, sendo ausente o glicogênio. Conclui-se que as glândulas anexas do trato reprodutor da paca apresentam características histoquímicas que compartilham certa similaridade com outras espécies da ordem Rodentia, com a presença de glicoproteínas neutras e ácidas em algumas glândulas, principalmente no epitélio da glândula bulbouretal e na borda em escova do epitélio das demais glândulas.(AU)

Paca is a wild rodent typical of the tropical region. In order to study this species with focus on the proper management and preservation, this study aims to characterize the histochemistry of the accessory glands of the reproductive tract of the male paca. For this purpose, histological sections were stained with Periodic Acid-Schiff (PAS), Alcian Blue (AB), PAS + AB e PAS + Amilase. In the histochemical reaction of the bulbouretral gland was found that the epithelium produces secretion rich in neutral and acid glycoproteins, glycosaminoglycans, and in some regions produces more than one type of secretion. The epithelium did not contain any glycogen. In the vesicular gland the epithelium had bush border stained by neutral glycoproteins, but no acid glycoproteins, glycogen or glycosaminoglycan. The coagulating gland showed small amount of neutral glycoproteins in the brush border of the epithelium, without glycogen. It is concludes that the accessory glands of paca have histochemical characteristics that share some similarity with other species of the Order Rodentia, with some glands with neutral and acid glycoproteins, mainly in the epithelium of the bulbouretral gland and in the brush border of the other glands.(AU)

Histologia do fígado de tilápia do Nilo (Oreochromis niloticus) alimentados com dietas contendo silagem biológica de pescado / Histology liver in Nile tilapia (Oreochromis niloticus) fed diets with fish silage

Este estudo teve como objetivo avaliar as possíveis alterações histopatológicas hepática de tilápias do Nilo alimentadas com dietas contendo silagem biológica de pescado com diferentes concentrações protéicas. Foram utilizados 180 juvenis alimentados com dietas contendo três níveis de proteína (20, 24 and 28% PB), e duas proporções de silagem biológica (» e ½) durante 75 dias. Os fragementos de fígado foram fixados em Bouin e inclusos em Histosec®. Posteriorente foram cortados em microtomo com espessura de 2 a 5µm. O método utilizado para coloração foi hematoxilina/eosina e PAS. Os cortes histológicos foram analisados em microscopio de luz. O desarranjo na morfologia do fígado dos peixes alimentados com silagem biológica foi influenciado pelos altos níveis protéicos, e pelo aumento ½ de proporções de proteínas de origem animal das dietas. Foi observado que a variação dos hepatócitos está diretamente ligada com o tipo da dieta fornecida para os peixes. Nos peixes alimentados com as dietas contendo 28% PB, o fígado apresentou desarranjo da estrutura cordonal dos hepatócitos, pontos de necrose e deslocamento do núcleo para periferia. Níveis elevados de silagem biológica de pescado provoca alterações deletérias no fígado. O nível de proteína adequado para manter o desenvolvimento associado à saúde do peixe é de 24%PB.(AU)

This study aimed to evaluate possible histopathological liver of tilapia fed diets containing fish silage and level protein. Sample of 180 fed with tilapia fingerlings fed with diets containing three protein levels (20, 24 and 28% CP), and Proportions residue fermented silage of tilapia (» and ½) of were analyzed during 75 days. The tissue fragments were fixed in Bouin and included in Histosec®. After that, between 2 to 5µm slices were done in a rotation microtome. The methods used for tissue analysis were hematoxilin/eosin and PAS. The histological slices were examined under light microscope (Olympus BX-50). The disarray in the morphology of the liver of fish fed biological silage was influenced by high protein levels, and increased proportions of ½ of animal protein diets. It was observed that the variation of hepatocytes is directly related to the type of diet for fish. In fish fed diets containing 28% CP, the liver showed disruption of the structure cordon of hepatocytes, necrosis and shifting points of the core to the periphery. Elevated levels of biological fish silage cause deleterious changes in the liver. The level of protein required to maintain the health of the associated development fish is 24% crude protein.(AU)

Copper sulfate acute ecotoxicity and environmental risk for tropical fish / Ecotoxicidade aguda e risco ambiental do sultado de cobre para peixes tropicais

The aim of this study was to estimate copper sulfate acute toxicity and to determine death percentage and environmental risk on guppy fish (Phallocerus caudimaculatus), zebrafish (Brachydanio rerio), mato grosso (Hyphessobrycon eques), and pacu (Piaractus mesopotamicus). Fish were exposed to 0.01, 0.03, 0.05, 0.07, 0.10, and 0.30 mg L-1 (guppy), 0.05, 0.07, 0.10, and 0.30 mg L-1 (zebrafish), 0.07, 0.10, 0.20, and 0.30 mg L-1 (mato grosso) and 9.5, 10.0, 10.5, 11.0, 11.5, and 12.0 mg L-1 (pacu) of copper sulfate, with triplicate control. The estimated 50% average lethal concentrations (LC50; 96 hours) were 0.05 (guppy), 0.13 (zebrafish); 0.16 (mato grosso) and 10.36 mg L-1 (pacu). Copper sulfate was extremely toxic for guppy, highly toxic for zebrafish and mato grosso and lightly toxic for pacu and presents environmental risk of high adverse effects on the guppy, zebrafish and mato grosso and moderate adverse effect to the pacu. Therefore, the guppy fish, zebrafish, and mato grosso are important alternatives for copper sulfate toxicity evaluation in waterbodies.

O objetivo deste estudo foi estimar a toxicidade aguda, determinar a porcentagem de mortalidade e o risco ambiental do sulfato de cobre para o peixe guaru (Phallocerus caudimaculatus), zebrafish (Brachydanio rerio), mato grosso (Hyphessobryconeques) e pacu (Piaractus mesopotamicus). Para realização dos ensaios com sulfato de cobre foram utilizados: 0,01; 0,03; 0,05; 0,07; 0,10 e 0,30 mg L-1 (guaru), 0,05; 0,07; 0,10 e 0,30 mg L-1 (paulistinha), 0,07; 0,10; 0,20 e 0,30 mg L-1 (mato grosso) e 9,5; 10,0; 10,5; 11,0; 11,5 e 12,0 mg L-1 (pacu) como controle em triplicata. A concentração letal média 50% (CL50; 96h) estimada para o guaru foi de 0,05, para o paulistinha foi de 0,13 para o mato grosso foi de 0,16 e para o pacu foi de 10,36 mg L-1. O sulfato de cobre foi classificado como extremamente tóxico para o guaru, altamente tóxico para o paulistinha e mato grosso e ligeiramente tóxico para o pacu e apresenta risco ambiental de elevado efeito adverso para o guaru, paulistinha e mato grosso e moderado efeito adverso para o pacu. Assim, conclui-se que o guaru, paulistinha e mato grosso são importantes alternativas para avaliação da toxicidade do sulfato de cobre em corpos hídricos.

Histopathological evaluation of seven Amazon species of freshwater ornamental armored catfish / Avaliação histopatológica em sete especies de cascudos ornamentais amazônicos

Fish commonly known as acaris or plecos are freshwater armored catfish economically important as a food resource and as ornamental fish. Most of these species are captured in the Amazon region. However, despite its economic importance, there is a lack of knowledge about their biological aspects. Thus, this study aimed to characterize and evaluate the histopathological aspects of important organs as gills, liver, integument and kidney of seven species of armored freshwater ornamental catfish from Guamá River, Pará State, Brazil. All organs showed typical characteristics of organs of other teleosts. In some species, gills and liver showed slight histopathological changes: telangiectasis, edema and morphological changes related to the presence of parasites (Monogenea and Digenea) in the gills, and changes in the arrangement of hepatocytes rows, and vacuolation of hepatocytes in the liver. Thus, the knowledge of the normal structure of organs and changes found can be used as tools for environmental and health monitoring of animals.

Os peixes conhecidos como Acaris ou Cascudos são siluriformes de água doce com o corpo revestido por placas ósseas, economicamente importantes como fonte de alimento e peixes ornamentais. A maioria destas espécies é capturada na região amazônica. Contudo, apesar de sua importância econômica, há desconhecimento sobre os aspectos biológicos desses peixes. Assim, o objetivo deste trabalho foi caracterizar e avaliar histologicamente órgãos importantes (brânquias, fígado, rim e tegumento) de sete espécies de peixes ornamentais de água doce do rio Guamá, Pará, Brasil. Todos os órgãos observados apresentaram as características típicas dos órgãos de teleósteos. Em algumas espécies, as brânquias e o fígado mostraram pequenas alterações histopatológicas: edema, telangiectasias e alterações morfológicas relacionadas com a presença de parasitas (Monogenea e Digenea) nas brânquias, e modificações no arranjo de linhas de cordões de hepatócitos e vacuolização destas células foram também observadas. Assim, o conhecimento da estrutura dos órgãos e as alterações encontradas podem ser utilizados como ferramentas para o monitoramento ambiental e sanitário dos animais.

Histologia e histoquímica do intestino anterior de tilápia do Nilo (Oreochromis niloticus) alimentadas com dietas contendo silagem de peixe / Histology and histochemical the medium intestine in Nile tilapia (Oreochromis niloticus) fed diets with fish silage

O objetivo deste trabalho foi avaliar a histologia e a histoquímica do intestino anterior de tilápia do Nilo alimentadas com dietas contendo farinha de peixe ou silagem de peixe como fonte de proteína de origem animal. A espessura da vilosidade intestinal dos peixes alimentados com silagem fermentada de resíduo de tilápia foi influenciada pelos teores proteicos, independente das proporções de proteína de origem animal das dietas. Observou-se que a variação da intensidade de secreção de glicoproteínas pelas células caliciformes está diretamente ligada com o tipo de dieta fornecida aos animais. O intestino médio de Oreochromis niloticus apresentou diferenças no padrão de secreção de muco glicoproteico neutro, glicoproteínas ácidas e glicoconjugados, dependendo da origem da proteína e da porcentagem utilizada na dieta, demonstrando que esta espécie pode adaptar seu sistema de secreção para a proteção do aparelho digestório durante a absorção de diferentes fontes proteicas.

This work was carried out to evaluate the action of the fermented fish silage and fish meal in the histochemical of the middle intestine of O. niloticus. A great epithelium intestinal was present in fishes fed with fish silage, independent of the animal origin protein proportions in diets. It was observed that the variation of the goblet cells secretion glicoproteic intensity is linked directly to the diet supplied to animals. The middle intestine of Oreochromis niloticus showed differences in the neutral mucus glicoproteic, acid glicoproteic and glicoconjugated secretion pattern, depending on the protein origin and the percentage used in the diet, demonstrating that this species can adapt its secretion system for the protection of the digesting apparatus during the absorption of different protein sources.

Efeitos tóxicos de surfactantes fitossanitários para o peixe mato grosso (Hyphessobrycon eques) / Toxic effects of phytosanitary surfactants for jewel tetra (Hyphessobrycon eques)

Os surfactantes são moléculas anfipáticas que reduzem a tensão superficial da água e fazem parte dos componentes inertes das formulações de produtos fitossanitários. Assim, os objetivos deste trabalho foram: estimar a concentração letal (CL(I)(50;96h)); classificar e avaliar a qualidade da água durante os testes de toxicidade aguda dos surfactantes: Agral®, Aterbane® BR, Ag-Bem®, Energic®, Fixade® e Gotafix® para o peixe mato grosso (Hyphessobrycon eques); e os sinais de intoxicação nos animais. Para tanto, os peixes foram aclimatados por dez dias em sala de bioensaio. Os animais foram expostos aos surfactantes em DIC com três repetições. A CL(I)(50;96h) do surfactante Agral® foi 3,29 mg L-1; do Aterbane® BR, 8,21 mg L-1; do Energic®, 2,34 mg L-1; do Gotafix®, 4,37 mg L-1; do Fixade®, 3,38 mg L-1 e do Ag-Bem®, 34,95 mg L-1. As variáveis de qualidade da água não foram alteradas. Os peixes apresentaram aumento do batimento opercular após a exposição; 4 e 24h, perda da capacidade de arfagem; 48h, batimento opercular lento e 72 e 96h, recuperação. Os surfactantes Energic®, Agral®, Gotafix®, Aterbane® BR e Fixade® podem ser classificados como moderadamente tóxicos e o Ag-Bem® como pouco tóxico para H. eques e este organismo apresenta sinais de intoxicação semelhantes para todos os surfactantes.

Surfactants are amphipatic molecules that reduce the surface tension of water and make up the inert components of pesticide formulations. Thus, the objectives of this study were: to estimate the lethal concentration (LC(I)50;96h); classify and evaluate water quality during testing of the following surfactants: Agral®, Aterbane® BR, Ag-bem®, Energic®, Fixade® and Gotafix® for jewel tetra (Hyphessobrycon eques); and the signs of intoxication in the animals. For this, the fish were acclimated for ten days in the bioassay room. The animals were exposed to the surfactants in an entirely randomized design with three replications. The LC(I)(50;96h) of surfactant Agral® was 3.29 mg L-1; Aterbane® BR 8.21 mg L- 1; Energic® 2.34 mg L-1; Gotafix® 4.37 mg L- 1; Fixade® 3.38 mg L-1; and Ag-bem® 34.95 mg L-1. The variables of water quality were unchanged. The fish showed an increase in the opercular beating after exposure; 4 and 24 hours, loss of gasping ability; 48 hours, slow opercular beating; and 72 and 96 hours later, recovery. The surfactants Energic®, Agral®, Gotafix®, Aterbane® BR and Fixade® can be classified as moderately toxics, and Ag-Bem® as slightly toxic for H. eques; this organism shows similar intoxication signs for all surfactants.

Observações morfológicas no epitélio de revestimento da rede testicular (RT) de codorna (Coturnix coturnix) da variedade italiana / Morphological features on the surface epithelium of the rete testis (RT) of quail (Cotunix coturnix) from the italian variety

A rede testicular (RT) de codorna é predominantemente do tipo intra-albugínica e constituída por canais tortuosos, revestidos por células epiteliais, estendendo-se pela túnica albugínea do testículo e a seguir penetram na estrutura microscópica da região epididimária (RE), pelo seu tecido matricial. Os canais da RT são contínuos com os ductos eferentes proximais da RE. A ultraestrutura do epitélio de revestimento da RT mostra diferenças marcantes na primavera - a fase proliferativa do ciclo reprodutivo, e em meados do outono - a fase quiescente do ciclo reprodutivo nesta ave. As características ultraestruturais marcantes dos epiteliócitos da RT, nestas duas fases, foram a baixa eletrodensidade citoplasmática e ocorrência de poucas vesículas e lisossomos no outono, que aparecem com maior freqüência na RT primaveril. Aspectos degenerativos de organelas, e presença de extrusões citoplasmáticas apicais, apareceram em número expressivo no outono, não se observando aspectos ultraestruturais marcantes nas estações de inverno e verão, relativamente às observações de primavera.

The RT of domestic quail from Italian variety showed mainly an albuginic pattern being represented by tortuous channels lined predominately by a simple cubic epithelium. RT channels extended along the testicular albuginea and penetrates into the epididymal region (ER) through its myoconnective matrix. Passageways were continuous to proximal efferent ducts of the ER. Epithelium lining ultrastructure of RT passageways showed some differences between the spring and the inactive phase at middle fall, concerning the quail testicular reproductive cycle. The features observed in RT epitheliocytes in fall were the low cytoplasmic electrodensity, paucity of supranuclear vesicles, which were abundant and variable in form and shape in spring, and some degenerative aspects of cell organelles mainly in ER lamellae. Moreover, presence of apical cytoplasmic extrusions were verified in the fall. No marked features were seen in the RT ultrastructure during the winter and summer comparatively to the active phase of spring.

Vas deferens surface epithelium of Agouti paca: fine structural features / Epitelio del conducto deferente de Agouti paca: observaciones de estructura fina

The surface epithelium of the vas deferens of Agouti paca, a wild and large South American rodent, was basically formed by principal and basal cells being only the principal cells related to endocytosis processes and also secretion taking base on their cytoplasmic ultrastructural features. Principal cell of vas deferens epithelium were characterized mainly by presence of vesicles with several shapes, sizes and internalized content at their apical cytoplasm occurring smaller pits and pale small vesicles seen next to the apical brush border of microvillus. Moreover, coated vesicles, smooth surface vesicles and great vesicles; multivesicular bodies, endosomes and lysosomes were seen. Presence of an apocrine secretory apparatus was also viewed, showing apical cytoplasmic expansions protruding into the vas deferens luminal compartment. The basal flattened cells, without luminal surface contact, occurred next to the basement membrane of the ductus, and did no exhibit special ultrastructural features.

El epitelio que recubre la luz del conducto deferente de la laca (Agouti paca), un roedor silvestre de Sudamérica, está formado por células principales (P) y básales (B), en donde las células principales están asociadas a los procesos de endocitosis y secreción, teniendo una base en su característica ultraestructural citoplasmática. Las células principales de los vasos deferentes del epitelio se caracteriza principalmente por la presencia de vesículas con variadas formas, tamaños y contenido interior en su citoplasma apical produciendo pequeñas invaginaciones y pequeñas vesículas pálidas ubicadas continuas al borde en cepillo de las microveilosidades apicales. Además, fueron observados, vesículas de superficie lisa y vesículas de gran tamaño; órganos multivesiculares, endosomas y lisosomas. También se observó la presencia de un aparato secretor apocrino, con expansiones citoplasmáticas apicales que se protruyen en el compartimiento luminar del conducto deferente. Células básales aplanadas, sin contacto con la superficie luminal, se encuentran junto a la membrana basal del conducto, las que no presentan características ultraestructurales especiales.

Acute toxicity of copper sulfate and aqueous extract of dried neem leaves on snails (Pomacea canaliculata) - DOI: 10.4025/actascibiolsci.v30i3.3615 / Toxicidade aguda do sulfato de cobre e do extrato aquoso de folhas secas de nim para o caramujo (Pomacea canaliculata) - DOI: 10.4025/actascibiolsci.v30i2.3615

Snails can become an environmental and economic problem, causing substantial losses. The objective of this work was to estimate the acute toxicity of copper sulfate pentahydrate (CuSO4.5H2O) and the aqueous extract of dried neem leaves on snails (P. canaliculata) under laboratory conditions. In order to estimate the lethal concentration 50% (LC (I)50;96h), snails were exposed to six increasing copper sulfate concentrations (0.0; 0.01; 0.03; 0.05; 0.07 and 0.1 mg L-1) and six increasing concentrations of aqueous extract of dried neem leaves 0.0; 100; 125; 150; 175 and 200 mL aqueous extract of dried neem leaves L-1 water, equivalent to (0.0; 1.18; 1.47; 1.77; 2.06; and 2.36 mg azadirachtin L-1), in triplicate and one control treatment in an entirely random delineation. Estimated LC (I)(50;96h) of copper sulfate was 0.02 mg copper sulfate L-1, with a 0.01 mg L-1 lower limit and a 0.03 mg L-1 upper limit. Estimated lethal concentration 50% of the aqueous extract of dried neem leaves was 142.75 mL L-1, equivalent to 1.68 mg L-1 of azadirachtine, with a 130.89 mL L-1 (1.54 mg L-1) low limit and 155.69 mL L-1 (1.83 mg L-1) as the upper limit.

Os caramujos podem se tornar um problema ambiental e econômico, podendo causar muitos prejuízos. O trabalho teve como objetivo estimar a toxicidade aguda do sulfato de cobre pentaidratado (CuSO4.5H2O) e do extrato aquoso de folhas secas de nim para o P. canaliculata, em condição de laboratório. Para determinação da CL (I)(50;96h), o caramujo foi exposto a seis concentrações crescentes de sulfato de cobre (0,0; 0,01; 0,03; 0,05; 0,07 e 0,1 mg L-1) e a seis concentrações crescentes de extrato aquoso de folhas secas de nim (0,0; 100; 125; 150; 175 e 200 mL de extrato aquoso de folhas secas de nim L-1 de água), equivalente a 0,0; 1,18; 1,47; 1,77; 2,06; e 2,36 mg de azadiractina L-1, com três repetições e um tratamento-controle em um experimento no delineamento inteiramente casualizado (DIC). A CL (I)(50;96h) estimada para o caramujo foi de 0,07 mg de sulfato de cobre L-1, com limite inferior de 0,05 mg L-1 e limite superior de 0,1 mg L-1. A concentração letal 50% (CL (I)50;96h) estimada do extrato aquoso de folhas secas de nim (EAFSN) para o caramujo foi de 142,75 mL L-1, equivalente a 1,68 mg L-1 de azadiractina, com limite inferior de 130,89 mL L-1 (1,54, mg L-1) e limite superior de 155,69 mL L-1 (1,83 mg L-1).

Acute toxicity and histopathologic effects of diquat herbicide on the gill and liver of nile tilapia (Oreochromis niloticus) / Toxicidade aguda e efeitos histopatológicos do herbicida diquat na brânquia e no fígado da tilápia nilótica (Oreochromis niloticus) - DOI: 10.4025/actascibiolsci.v30i1.1462

The lethal concentration of 50% (LC (I) 50-96h) and the histopathologic effects of diquat herbicide on Nile tilapia (Oreochromis niloticus) fish were evaluated in three experiments. The fishes were exposed to concentrations of 0, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55 and 60 mg diquat L-1, and gill and liver histology were evaluated in the surviving fishes. The estimated LC (I) (50-96h) of diquat was 37.28 mg L-1, with lower limits of 33.12 mg L-1 and upper limits of 41.44 mg L-1. In the treatment with 30, 35 and 40 mg L-1, signs of apical fusion of the secondary lamellae were observed; with 45 and 50 mg L-1, congestion of the primary lamellae was observed; in the treatment with 55 mg L-1, congestion of blood vessels on secondary lamellae took place. The livers of fishes in treatments with 0, 25, 30 and 35 mg L-1 showed cordonal organization of hepatocytes. In the treatments with 40 and 45 mg L-1, hypertrophy of hepatocytes took place; with 50 and 55 mg L-1, cell fusion and the presence of vacuoles inside hepatocytes were observed. Diquat presented low risk of toxicity for Nile tilapia, as the more severe histopathologic alterations occurred only in higher concentrations

A concentração letal 50% e os efeitos histopatológicos do herbicida diquat para a tilápia nilótica (Oreochromis niloticus) foram avaliados em três experimentos. Os peixes foram expostos às concentrações de 0; 25; 30; 35; 40; 45; 50; 55; e 60 mg de diquat L-1 e a histologia da brânquia e do fígado foi avaliada nos peixes sobreviventes. A CL (I) 50-96h do diquat estimada foi de 37,28 mg L-1, com limite inferior de 33,12 mg L-1 e superior de 41,44 mg L-1. No tratamento com 30, 35 e 40 mg L-1, ocorreram início de fusão apical das lamelas secundárias; com 45 e 50 mg L-1 ocorreram congestão nas lamelas primárias e no tratamento com 55 mg L-1, ocorreu congestão sangüínea nas lamelas secundárias. O fígado dos peixes dos tratamentos controle, 30 e 35 mg L-1 estavam com organização cordonal dos hepatócitos. Nos tratamentos com 40 e 45 mg L-1, ocorreram hipertrofia dos hepatócitos; com 50 e 55 mg L-1 ocorreram fusão celular e presença de vacúolos. O diquat apresentou baixo risco de intoxicação à tilápia nilótica e as alterações histopatológicas mais severas ocorreram somente nas concentrações mais elevadas

Toxicidade aguda e efeitos histopatológicos do diquate na brânquia e no fígado do Piauçu (Leporinus macrocephalus) / Diquat acute toxicity and histopathological effects on Leporinus Macrocephalus's gliss and liver

A concentração letal (CL 9I) 50-96h e os efeitos histopatológicos do diquate para o piauçu (Leporinus macrocephalus) foram avaliados em três experimentos conduzidos em condições de laboratório. Os peixes foram expostos ás concentrações de 0; 12; 18; 24; 30; 36; 42; 48; 54 e 60 mg de diquate/L e a histologia da brânquia e do fígado avaliada nos peixes sobreviventes. A concentração letal (CL 9I050-96h) foi de 34,76 mg/L. Nos tratamentos controle, 12 e 18 mg/L as brânquias dos peixes estavam revestidas por epitélio estratificado que em intervalos regulares formaram as lamelas secundárias, constituídas por duas camadas de células epiteliais pavimentosas, células pilares, células-cloreto e células mucosas. Nos tratamentos com 24, 30, 36, 42 e 48 mg/L ocorreu hiperplasia das células de revestimento, das mucosas e das células cloreto no espaço interlamelar. No tratamento com 54 mg/L verificou-se edema subepitelial e fusão apical das lamelas secundárias. O fígado do piauçu nos tratamentos controle e 12 mg/L apresentaram arranjo cordonal dos hepatócitos. Nos tratamentos com 18, 24, 30, 36, 42, 48 e 54 mg/L ocorreu congestão no interior dos capilares sinusóides. Nos tratamentos com 48 e 54 mg/L constatou-se a presença de grânulo de glicogênio no interior da célula, início de necrose dos hepatopâncreas, congestão e fusão celular. O diquate mostrou-se pouco tóxico para o L macrocephalus, e as alterações histopatológcas que ocorreram na brãnquia e no fígado dos peixes são reversíveis.

Avaliação histológica de membranas biológicas bovinasconservadas em glicerina e a fresco / Histological evaluation of fresh and glycerin preservedbovine biological membranes

Membranas biológicas são utilizadas em procedimentos cirúrgicos para fornecer um arcabouço e orientar o desenvolvimento de novos tecidos, mediante processos de reparação, que restabeleçam a estrutura e a função dos tecidos lesados. Assim, objetivou-se com este trabalho avaliar as características histológicas do centro tendíneo, da dura-máter, da fáscia lata, do pericárdio, do peritônio e da túnica vaginal de bovinos conservados em glicerina a 98% por período de 15, 30, 60 e 90 dias e a fresco. Para tanto, coletou-se fragmentos dessas membranas de dez bovinos mestiços, machos, com idade entre 30 e 36 meses, empregando-se técnicas de microscopia de luz convencionais. Não se observou diferenças marcantes quanto à integridade morfológica e estrutural dos elementos que constituem tanto as amostras do material a fresco quanto àqueles conservados em glicerina a 98%, que exibiram células mesoteliais e fibras conjuntivas sem alterações marcantes. Notou-se também o esmaecimento na coloração geral e maior evidenciação dos núcleos nas membranas conservadas em glicerina. Conclui-se que a glicerina é eficaz para conservação de membranas biológicas.

Biological membranes are used in surgical procedures to supply a skeleton and to guide the development of new tissues, under repairing processes, wich re-establish the structure and the function of injured tissues. So, with this study it was objectified to evaluate the histological characteristics of bovine tendinous center, dura mater, fascia lata, pericardium, peritoneum and vaginal tunic, fresh and 98% glycerin conserved for periods of 15, 30, 60 and 90 days. It was collected membranes’ fragments of ten crossbreed bovines, male, with age between 30 and 36 months, using histological conventional techniques. There was no marking differences as for the morphologic and stuctural integrity of the elements that constitutes the samples of fresh and 98% glycerin conserved material, evidencing mesothelial cells and connective tissue without intense alterations. It was still noticed a weakness in the general coloration and bigger evidenciation of the nucleous in the membranes conserved in glycerin. It can be concluded that glycerin is efficient to the conservation of biological membranes.

Morfologia microscópica do nervo radial do gato doméstico (Felis catus domesticus LINNAEUS, 1758) / Microscopic morphology of the radial nerve in domestic cat (Felis catus domesticus LINNAEUS, 1758)

No presente estudo investigou-se a estrutura histológica do nervo radial do gato doméstico. Foram utilizados cinco gatos, três fêmeas e dois machos, sem raça definida, provenientes do CCZ de Jaboticabal, SP. Dividiu-se o nervo em três regiões e foram coletados três segmentos: proximal, médio e distal. Após procedimentos de rotina histológica convencional, observou-se três tecidos de sustentação: o epineuro, o perineuro e o endoneuro. O epineuro é formado por tecido conjuntivo denso modelado e não modelado, e também por conjuntivo frouxo. Do epineuro partem septos, constituídos por conjuntivo denso não modelado e frouxo, rico em células adiposas. O perineuro, que reveste grupo de feixes nervosos, formando os fascículos, possui de duas a quinze camadas de células justapostas concêntricas com núcleo fusiforme, citoplasma delgado e alongado, diferenciando duas camadas, uma externa e outra interna. O espaço interlaminar da camada externa é preenchido por fibras colágenas e o da camada interna por fibras colágenas e reticulares. O endoneuro é constituído por tecido conjuntivo frouxo que circunda axônios predominantemente mielinizados, apresentando fibras colágenas e reticulares. Analisou-se, também, no presente estudo, o arranjo dos fascículos nervosos, notando-se no segmento proximal média de 11,50 + ou - 5,40 pequenos fascículos de diâmetros variados. O segmento médio apresentou média de 10,20 + ou - 2,94 fascículos com diâmetros maiores que os do segmento proximal. O segmento distal apresentou média de 15,30 + ou - 3,89 fascículos exibindo várias dimensões e menores que os observados no segmento médio. A análise estatística dos resultados demonstra diferença significativa (p<0,05) para as comparações das médias efetuadas entre as regiões estudadas. Os tecidos de revestimento do nervo radial do gato se apresentaram de modo semelhante aos descritos nos animais domésticos.

The aim of this study was to describe the histological structure of the domestic cat´s radial nerve, which has three conjunctive tissues for sustentation. The epineurium is formed by dense modeled and non modeled conjunctive tissue, and loose conjunctive tissue. Of epineurium they break septum for perineurium. They are rich in adipose cells and are formed by dense non-modeled conjunctive tissue and by loose conjunctive tissue. The perineurium revests a group of nervous bundles and has from two to fifteen juxtaposed cells. These cells are concentric and they have a fusiform nucleus, a thin and prolonged cytoplasm that is divided in two layers – one external and other internal. The external layer´s interlaminar space is filled by collagen fibers and the internal layer´s by collagen and reticular fibers. The endoneurium is formed by loose conjunctive tissue that embraces predominantly myelinated axons, and also has collagen and reticular fibers. It was also analyzed in the present study the arrangement of the nervous fascicles, noticing in the proximal segment the average from 11.5 to 5.4 small fascicles of varied diameters. The medium segment presented the average from 10.2 to 2.94 fascicles with bigger diameters than the proximal segment. The distal segment presented the average from 15.3 to 3.89 fascicles showing a lot of dimensions and smaller than the observed ones in the medium segment. The statistic analysis of the results demonstrated significant difference (p<0.05) to the comparisons of the averages effected between the studied regions. The revestiment tissues of the radial nerve had been presented in a similar way to the described ones in the domestic animals.

Morphology of oesophagus and crop of the partrigde Rhynchotus rufescens (Tiramidae) - DOI: 10.4025/actascibiolsci.v28i2.1041 / Morfologia do esôfago e do papo de perdizes Rhynchotus rufescens (Tiramidae) - DOI: 10.4025/actascibiolsci.v28i2.1041

Twenty adult partridges Rhynchotus rufescens were used to study the morphology of oesophagus and crop. Materials to the morphologic study were collected and lengths of the oesophagus and of the crop were measured. For histological study, fragments of the oesophagus and of the crop were stained routinely with Massons trichrome stain. Total oesophagus was larger in females. In the entrance of the thorax, its ventral wall is enlarged broadly, forming the crop, which is larger in males. Oesophagus mucosa is constituted by stratified squamous epithelium, with mucous glands and lymphatic tissues. There are three layers of smooth muscle, involved in serosa. The histological structure of the crop is similar to the oesophagus. The mucous glands are reduced in size and the lymphatic tissues are dispersed in the connective tissue. There is a thin stratum of smooth muscle and other two wider layers of longitudinal and circular musculature.

Vinte exemplares de Rhynchotus rufescens foram utilizadas para estudar a morfologia do esôfago e do papo. O material para o estudo morfológico foi coletado e o comprimento dos órgãos foi avaliado. Para o estudo histológico, as secções histológicas foram coradas com tricromo de Masson, posteriormente analisadas e descritas. O comprimento médio total do esôfago foi maior em fêmeas. Na entrada do tórax, a parede ventral do esôfago se dilata, formando o papo, maior em machos. A mucosa do esôfago é formada por epitélio escamoso estratificado, com glândulas mucosas e nódulos linfáticos. Há três camadas de músculo liso, as quais são envolvidas por serosa. A característica histológica do papo é semelhante à do esôfago. No papo, as glândulas mucosas são menores e os nódulos linfáticos estão dispersos no tecido conjuntivo. Há uma camada delgada de músculo liso e outras duas camadas mais largas de musculaturas longitudinal e circular.

Morphology of glandular stomach (Ventriculus glandularis) and muscular stomach (Ventriculus muscularis) of the partrigde Rhynchotus rufescens

Vinte perdizes Rhynchotus rufescens adultas foram utilizadas para estudo morfológico do proventrículo e ventrículo gástricos da perdiz Rhynchotus rufescens. Os materiais foram coletados e os comprimentos do proventrículo e do ventrículo gástricos foram avaliados. Para o estudo histológico, fragmentos dos estômagos foram corados pelas técnicas de ácido periódico de Schiff (PAS) e tricromo de Masson. O proventrículo gástrico é alongado, com formato fusiforme direcionado no sentido craniocaudalmente e para a esquerda, e apresenta um comprimento médio 3,20cm nas fêmeas e 3,65cm nos machos. Histologicamente, o proventrículo gástrico é composto por vários lobos e glândulas. A mucosa é formada por epitélio cúbico, sendo bastante pregueada. O ventrículo gástrico tem o formato de uma lente biconvexa, com comprimento médio de 4,30cm nas fêmeas e 4,35cm nos machos. A mucosa é formada por pregas revestidas por células cilíndricas e pelo muco formador da cutícula. Há criptas na base das pregas. Em seguida, há uma lâmina própria e uma espessa camada muscular lisa, que se encontra direcionada de acordo com o formato do ventrículo gástrico. A serosa é constituída por uma densa porção de tecido conjuntivo, entremeado por algumas células musculares lisas.

Morphology of beak and tongue of partrigde Rhynchotus rufescens

Vinte perdizes Rhynchotus rufescens foram utilizadas para estudar a morfologia do bico e da língua. Os comprimentos do bico e da língua foram avaliados, e secções histológicas foram coradas com Hematoxilina-Eosina (HE), ácido periódico de Schiff (PAS) e tricromo de Masson, posteriormente analisadas e descritas. O bico da perdiz em ambos os sexos são curvos, duros e com uma extremidade pontiaguda tendo em média de 4,90cm de comprimento para as fêmeas e 4,80 para os machos. A língua é caracterizada por um formato triangular e possui em média 1cm de comprimento para ambos os sexos, sendo sua extremidade pontiaguda. A organização histológica da língua apresenta epitélio estratificado queratinizado com papilas filiformes em toda a superfície, glândulas mucosas com ductos que se projetam na superfície epitelial e cartilagem hialina em todo o comprimento, localizada sobre a musculatura esquelética, a qual é orientada em várias direções.

Structural and ultrastructural characteristics of the spermatogenesis of the grey armored catfish Liposarcus anisitsi (Holmberg, 1893) (Teleostei, Siluriformes)

Liposarcus anisitsi é um teleósteo de água doce da ordem Siluriforme, com fertilização externa, possui um processo de espematogênese cística com estrutura espermatogonial lobular irrestrita dos testículos. Nesta espécie, a espermatogônia primária intracística ou isolada é considerada como a stem cell da linhagem espermatogenética. Então, como consequência do processo da espermatogênese cística de Liposarcus anisitsi todas as três células germinativas são observadas no interior de cistos espermatogenéticos específicos, desde as espermatogônias primárias e secundárias até os espermatócitos e espermátides jovens e maduras. A espermatogônia possui forma esférica, com núcleo central e grande quantidade de mitocôndrias redondas e retículo endoplasmático, principalmente do tipo rugoso, em seu citoplasma. Os espermatócitos primários se inter-relacionam através de pontes citoplasmáticas e são claramente identificados pela presença de complexos sinaptonêmicos no interior de seus núcleos. Espermátides jovens no início da fase maturacional, tanto quanto as espermátides maduras tendem a exibir núcleos esféricos, um modelo variável de progressiva condensação cromatínica durante o estágio final da espermiogênese. Nestes estágios finais, as espermátides maduras mostra uma fossa nuclear formada para a fixação do flagelo. O espermatozóide de Liposarcus anisitsi possui cabeça redonda, núcleo redondo, cromatina densa, ausência de acrossoma, curta peça intermediária e longa cauda (peças principal e terminal do flagelo).